石蜡包埋过程的步骤及要领

石蜡包埋是组织学研究中的一种常用技术,用于将组织样本固定在蜡块中,以便后续的切片和染色。下面是石蜡包埋过程的一般步骤及一些要领:

 

1. 组织固定:首先,将组织样本进行固定,通常使用10%的缓冲福尔马林(formalin)进行固定处理。固定时间一般为24-48小时,固定后的组织应进行脱水处理。

 

2. 脱水:将固定好的组织样本置于逐渐增加浓度的酒精溶液中,以去除水分。通常的脱水过程为:70%酒精(2小时)- 80%酒精(2小时)- 95%酒精(2小时)- 100%酒精(至少2小时)。

3. 渗透:在脱水后,将组织样本浸入可溶解于酒精中的透明介质,使其替代组织内的酒精。常用的透明介质有二甲苯(xylene)、氯仿(chloroform)等。每种介质需要足够的时间,以确保组织完全浸泡,并且渗透介质需要与后续使用的石蜡相溶。

 

4. 浸渍:将浸入渗透介质中的组织转移到石蜡中。在这一步骤中,组织会逐渐吸收石蜡,以取代渗透介质。通常使用多个浸渍剂进行多次浸渍,直到组织与石蜡完全融合。

 

5. 包埋:将浸渍后的组织转移到包埋模具或包埋盒中,将石蜡固化。通常,石蜡需要保持在温度约60-70℃下,直到完全固化。

 

要领:

- 每个步骤都需要充分时间,以确保组织样本被适当固定、脱水、浸渍和包埋。过短的处理时间可能会导致组织质量下降。

- 在液体转移时,应小心避免气泡的产生,以免影响组织质量。

- 为了避免交叉污染,可以在每个步骤中使用清洁的容器和工具。

- 包埋模具或包埋盒应牢固,并确保组织样本完全被石蜡包埋。

- 在包埋蜡固化之前,可以使用适当的标记或配位器将组织样本定位在模具中,以便后续的切片过程。

 

以上是石蜡包埋过程的一般步骤和要领。具体的操作可能会根据实验室的实际情况和使用的设备而有所不同。因此,在进行石蜡包埋前,请根据具体的实验要求和实验室的实践进行相应的调整和优化。

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