he染色的操作流程

HE染色(Hematoxylin and Eosin staining)是一种常用的组织切片染色技术,用于显微镜下观察和分析组织结构。下面是HE染色的操作流程:

 

1. 取得组织标本:从动物或人体中取得需要观察的组织标本,如肿瘤组织或器官组织。

 

2. 固定组织标本:将组织标本置于一定浓度的缓冲形式固定剂中,如10%的中性缓冲福尔马林溶液,固定时间一般为24小时。

 

3. 去除水分并包埋:将固定后的组织标本经过脱水处理,依次在梯度浓度的酒精和清洁剂中浸泡,使组织中的水分逐渐取代为酒精。然后将组织标本置于熔蜡中浸泡,使其渗透并包裹在蜡中。

 

4. 制备切片:将包埋好的组织标本从熔蜡坯中取出,用切片机用特殊的切刀切割成薄片,一般厚度为4-6微米。

 

5. 切片上染蜡:将切好的薄片浸泡在温水中,以去除蜡质。然后将切片依次浸入甲醇、酒精和水中,使其脱水并重新水合。接下来将切片依次浸入染色剂的容器中,如首先浸入碱性的苏木精染液(Hematoxylin染液),观察蓝色核染色。然后将切片迅速过蓝色水中以去除多余染料。最后将切片浸入酒精中,以去除残留染料。

 

6. 染色成像:将切片从酒精中取出,摆放在显微镜载物玻片上,加入适当量的透明剂(如亮油),覆盖一块玻片,用微量组织切片放片机压紧,使组织与载物玻片紧密贴合。最终将载物玻片上的切片放入显微镜中,使用适当的放大倍数观察和分析染色效果。

 

值得注意的是,HE染色的具体步骤可能会因实验目的和实验室流程的差异而有所变化,以上步骤仅供参考。

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