核酸电泳凝胶配制

核酸电泳通常使用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶。下面是两种凝胶的配制方法:

 

1. 琼脂糖凝胶配制方法:

- 1g琼脂糖加入100ml TAE/TBE缓冲液中,混合均匀。

- 如需要加入荧光素染料,则将0.5μl的荧光素染料溶液加入上述琼脂糖凝胶中,再混合均匀。

- 将混合好的琼脂糖溶液在室温下加热至琼脂糖完全溶解。

- 等待琼脂糖溶液降温至约60℃后,将样品加入凝胶中,混合均匀。

- 将混合好的溶液注入电泳槽中,等待凝胶固化。

 

2. 聚丙烯酰胺凝胶配制方法:

- 将约0.7g的聚丙烯酰胺加入50ml TAE/TBE/Tris缓冲液中,混合均匀。

- 0.05gTEMED加入凝胶溶液中,再加入0.1g的过硫酸铵,混合均匀。

- 快速将混合好的溶液倒入电泳槽中,同时插入梳子,等待凝胶固化。

 

注意事项:

- 当使用荧光素染料时,应尽可能减少激发强度和激发时间,以避免凝胶损伤和样品降解。

- 配制凝胶时,应根据样品的大小和数量选择不同的电泳槽和梳子尺寸,以确保样品能够充分分离。

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