原位末端凋亡法（TUNEL）检测原理.doc
原位末端凋亡法（TUNEL）是一种常用的细胞凋亡检测方法，其原理是利用荧光和酶标技术检测细胞死亡时DNA的末端，以反映细胞凋亡活动的程度和区分凋亡和坏死。
具体原理如下：
在细胞凋亡过程中，细胞核DNA出现末端切断，导致DNA末端暴露。TUNEL检测法通过利用末端脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid, DNA）中存在的自由3'末端羟基，使端粒转移酶（Terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT）在DNA末端加入特定的荧光标记，将凋亡的细胞与未凋亡的细胞区分开来。在TUNEL检测实验中，使用TdT将dUTP（脱氧尿苷三磷酸）或biotin-dUTP（生物素化的dUTP）标记于暴露在DNA末端的羟基上，以表达3'末端特异性的荧光或荧光素标记物。TdT和标记dUTP和/或生物素-dUTP的反应是双链DNA断裂的标志。可视化形成的荧光或酶标记物，从而显示细胞核中由凋亡引起的DNA损伤。
通过使用荧光染料或其他检测标记物与TUNEL反应产生的物质结合，可以使用显微镜或流式细胞术等方法对检测的细胞进行可视化和定量分析。TUNEL技术广泛应用于生物医学研究领域，如在研究肿瘤治疗、神经退行性疾病、心血管疾病等方面。
